Comparison of Total Anaerobic Microbiota in Periodontitis Before and After the Subgingival Irrigation with Chlorhexidine at 0. 12 % / Comparación de la Microbiota Anaerobia Total en Periodontitis antes y Después de la Irrigación Subgingival con Clorhexidina al 0, 12 %

ABSTRACT: The objective of this study was to determine the effect of the subgingival irrigation of chlorhexidine 0.12 % of the total anaerobic microbiota. Microbial sampling to 30 subjects with periodontitis stage II Grade B, in pockets with a periodontal probing depth > 4 mm. The subgingival irrigation was made with 5 mL of chlorhexidine in the test group and with 5 mL of distilled water in the control group. 24 hours after the procedure was obtained a second sample to compare. It was found that the subgingival irrigation with chlorhexidine at 0.12 % achieved a statistically significant decrease in anaerobic microbiota (p< 0.05).

RESUMEN: El objetivo del presente estudio fue determinar el efecto de la irrigación subgingival de la clorhexidina 0,12 % sobre la microbiota anaeróbica total. Se tomaron muestras microbiológicas a 30 sujetos con periodontitis estadio II grado B, en sacos periodontales con una profundidad de sondaje > 4 mm. Se realizó la irrigación subgingival con 5 mL. de clorhexidina en el grupo test y con 5 mL. de agua destilada en el grupo control. 24 horas después del procedimiento se obtuvo una segunda muestra a comparar. Se detectó que la irrigación subgingival con clorhexidina al 0,12 % logra disminuir en forma estadísticamente significativa la microbiota anaeróbica total (p< 0,05).

Potencial antimicrobiano de extratos glicólicos vegetais sobre bactérias anaeróbias / Antimicrobial potential of plant glycolic extracts on anaerobic bacteria

A resistência microbiana aos antibióticos disponíveis é preocupação constante, devido à dificuldade no tratamento de infecções causadas por cepas resistentes, em decorrência do uso indiscriminado de antimicrobianos. Assim, a busca por terapias antimicrobianas alternativas tem sido crescente e necessária, sendo a fitoterapia umas das opções de escolha. O objetivo do presente estudo foi analisar a atividade antibacteriana de extratos glicólicos de Achyrocline satureioides (macela), Cynara scolymus (alcachofra), Hamamelis virginiana (hamamelis) e Persea americana (abacateiro), pelos períodos de 5 min e 24 h de exposição sobre bactérias anaeróbias Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum, Parvimonas micra, Porphyromonas endodontalis e Porphyromonas gingivalis, em culturas planctônica e biofilmes. As bactérias armazenadas a -80ºC foram ativadas em caldo Brucella enriquecido (hemina 1%, menadiona 1% e sangue de carneiro desfibrinado 5%) e incubadas em câmara de anaerobiose por 48 h a 37ºC por sete dias. A partir de culturas puras, o teste de microdiluição em caldo foi conduzido em microplacas por meio de suspensões bacterianas padronizadas em solução fisiológica estéril (NaCl 0,9%) e diluições dos extratos em caldo, sendo as placas incubadas por 48 h a 37ºC em anaerobiose. Alíquotas de cada poço foram semeadas em ágar Brucella enriquecido. Após incubação, a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) foram determinadas. As concentrações efetivas de cada extrato foram aplicadas sobre os biofilmes de cada espécie, formados em microplacas a partir de suspensões bacterianas puras padronizadas na escala 0,5 de McFarland. As microplacas foram incubadas por sete dias a 37ºC para formação dos biofilmes, sendo o meio trocado a cada 48 h. Os biofilmes foram tratados por 5 min e 24 h. Em seguida, foram lavados e desprendidos por homogeneizador ultrassônico. As suspensões diluídas foram adicionadas em ágar Brucella enriquecido. Após 48 h, as Unidades Formadoras de Colônia por mililitro (UFC/mL) foram determinadas. Os resultados foram analisados por ANOVA e teste de Tukey ou por Kruskal-Wallis e teste Dunns, ambos com nível de significância de 5% (p≤0,05). Sobre as culturas planctônicas, a CIM e CBM dos extratos foi determinada apenas para F. nucleatum. A CBM dos extratos de A. satureioides, C. scolymus e P. americana foi obtida sobre P. micra. Não foi obtida atividade bactericida para P. endodontalis e P. gingivalis. Sobre biofilmes, todas as espécies apresentaram reduções significativas quando expostas aos extratos em ambos os tempos. Pode-se concluir que os extratos testados apresentaram efeito bacteriostático sobre F. nucleatum. Atividade bactericida dos extratos foi observada sobre F. nucleatum, bem como sobre P. micra, exceto para H. virginiana. Os extratos avaliados também apresentaram efeito antibiofilme sobre F. nucleatum, P. micra, P. endodontalis e P. gingivalis por 5 min e 24 h de exposição(AU)

Microbial resistance to antibiotics available is constant concern, due to the difficulty in treating infections caused by resistant strains as a result of the indiscriminate use of antimicrobials. Thus, the search for antimicrobial alternative therapies has been growing and necessary, being one option the herbal medicine. The objective of the present study was to analyze the antibacterial activity to Achyrocline satureioides glycolic extracts (macela), Cynara scolymus (artichoke), Hamamelis virginiana (Witch-Hazel) and Persea americana (avocado), for periods of 5 min and 24 h from exhibition on anaerobic bacteria Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum, Parvimonas micra, Porphyromonas gingivalis and Porphyromonas endodontalis in planktonic communities and biofilms. Bacteria stored at -80°C have been activated in Brucella broth enriched (hemin 1%, menadione 1% and defibrinated sheep blood 5%) and incubated in anaerobiose chamber for 48 h at 37° C for seven days. From pure cultures, the microdiluição test in broth was conducted in microplates through standardized bacterial suspensions in sterile saline solution (NaCl 0.9%) and dilution of the extracts in broth, being incubated plates for 48 h at 37° C in anaerobiosis. Aliquots of each well were sown in Brucella agar enriched. After incubation, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) were determined. Effective concentrations of each extract were applied on the biofilms of each species, formed in microplates from pure bacterial suspensions in 0.5 McFarland scale standard. The microplates were incubated for 7 days at 37°C for the formation of biofilms, being the culture medium replaced every 48 h. Biofilms were treated for 5 min and 24 h have been washed and given off by ultrasonic homogenizer. Dilute suspensions were added in Brucella agar enriched. After 48 h, the Colony Forming Units per milliliter (CFU/ml) were determined. The results were analyzed by ANOVA and Tukey test, or Kruskal-Wallis test and Dunns, both with a significance level of 5% (p ≤ 0.05). On the planktonic cultures, CIM and CBM of extracts was determined only to F. nucleatum. The CBM of the extracts of A. satureioides, C. scolymus and P. americana was obtained on P. micra. Bactericidal activity was not obtained for P. endodontalis and P. gingivalis. About biofilms, all species exhibited significant reductions when exposed to the extracts in both times. It can be concluded that the extracts tested showed bacteriostatic effect on F. nucleatum. Bactericidal activity of extracts was observed on F. nucleatum and P. micra, except for H. virginiana. The extracts evaluated also presented antibiofilme effect on F. nucleatum, P. micra, P. endodontalis and P. gingivalis for 5 min and 24 h(AU)

Utilidad de la espectrometría de masas MALDI-TOF en la identificación de bacterias anaerobias / Utility of MALDI-TOF MS for the identification of anaerobic bacteria

El análisis de espectrometría de masas mediante la metodología hoy conocida como MALDI-TOF MS (Matrix-assited laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry) se ha convertido en un recurso de referencia para la identificación de microorganismos en microbiología clínica. No obstante, los datos relativos a algunos grupos de microorganismos son todavía controvertidos. El objetivo del presente estudio fue determinar la utilidad del MALDI-TOF MS para la identificación de aislamientos clínicos de bacterias anaerobias. Se analizaron 106 aislamientos de bacterias anaerobias mediante MALDI-TOF MS y por pruebas bioquímicas convencionales. En aquellos casos en los que la identificación por metodología convencional no era aplicable o frente a una discordancia de resultados entre las metodologías citadas, se realizó la secuenciación del gen 16S del ARNr. El método convencional y el MALDI-TOF MS coincidieron a nivel de género y especie en un 95,3 % de los casos considerando la totalidad de los aislamientos estudiados. Al considerar solo el conjunto de los bacilos gram negativos, la coincidencia fue del 91,4 %; entre los bacilos gram positivos, fue del 100 %; los 8 aislados de cocos gram positivos estudiados coincidieron y también hubo coincidencia en el único coco gram negativo incluido. Los datos obtenidos en este estudio demuestran que el MALDI-TOF MS ofrece la posibilidad de llegar a una adecuada identificación de bacterias anaerobias

The analysis by MALDI-TOF MS (Matrix-assited laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry) has become a reference method for the identification of microorganisms in Clinical Microbiology. However, data on some groups of microorganisms are still controversial. The aim of this study is to determine the utility of MALDI-TOF MS for the identification of clinical isolates of anaerobic bacteria. One-hundred and six anaerobic bacteria isolates were analyzed by MALDI-TOF MS and by conventional biochemical tests. In those cases where identification by conventional methodology was not applicable or in the face of discordance between sequencing methodologies, 16 S rRNA gene sequence analysis was performed. The conventional method and MALDI-TOF MS agreed at genus and species level by 95.3 %. Concordance in gram-negative bacilli was 91.4% and 100% among gram-positive bacilli; there was also concordance both in the 8 isolates studied in gram-positive cocci and in the single gram-negative cocci included. The data obtained in this study demonstrate that MALDI-TOF MS offers the possibility of adequate identification of anaerobic bacteria

Impacto de la espectrometría de masas por MALDI-TOF MS en la identificación rápida de bacterias aeróbicas y anaeróbicas de importancia clínica / Impact of mass spectrometry by MALDI-TOF MS for the rapid identification of aerobic and anaerobic bacteria of clinical importance

Background: MALDI-TOF MS (Matrix Assisted Laser Desorption Ionization -Time of Flight Mass Spectrometry) technology, recently introduced in the microbiology laboratory has proven to be a precise and rapid method for bacterial identification. Objective: To evaluate the performance, costs associated and turnaround time of MALDI-TOF in a routine laboratory. Material and Method: Five hundred and sixty one clinical isolates (281 aerobes and 280 anaerobes) previously identified by conventional methods were evaluated. Discordances were resolved by means of 16S rRNA sequencing. Results: MALDI-TOF identified 95, 7% of the aerobes isolates and 86, 4% of the anaerobes. The groups with better performance were the enterobacteriacea and Bacteroides spp with 95% and 100% identification at the species level. The error rate of MALDI-TOF and conventional methods compared to sequencing was 0, 39% and 9, 4% respectively. The costs associated were 8 times lower with a turnaround time of 6 hours. Conclusion: MALDI-TOF proved to be simple, precise and less expensive technology compared to the traditional methods.

Introducción: La tecnología MALDI-TOF MS (Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry) incorporada recientemente en el laboratorio de microbiología ha demostrando ser un método rápido y preciso para la identificación bacteriana. Objetivo: Evaluar el desempeño de MALDI-TOF para la identificación de aislados clínicos, comparar los costos asociados y el tiempo en la entrega de resultados en un laboratorio de rutina. Material y Método: Se evaluaron un total de 561 aislados de pacientes (281 aeróbicos y 280 anaeróbicos estrictos) identificados previamente por métodos convencionales, los que fueron identificados por MALDI-TOF. Las discordancias fueron resueltas mediante secuenciación del 16S ARNr. Resultados: MALDI-TOF identificó adecuadamente a 95,7% de los aislados aeróbi-cos y 86,4% de los anaeróbicos estrictos, observándose el mayor porcentajes de identificación a nivel de especie en los grupos de enterobacterias y Bacteroides spp (95 y 100% respectivamente). La tasa de error de MALDI-TOF y métodos convencionales vs secuenciación fue de 0,39 y 9,4%, respectivamente. El costo asociado por identificación fue ocho veces menor que el de los métodos tradicionales con una demora promedio de seis horas en la entrega de resultados. Conclusión: MALDI-TOF mostró ser una tecnología simple, precisa y de menor costo que los métodos tradicionales.

Actividad antimicrobiana de cementos a base de trióxidos minerales agregados / Antimicrobial activity of mineral trioxide aggregates-based cements

El objetivo del presente estudio fue comparar in vitro la actividad antimicrobiana de dos cementos a base de trióxidos minerales agregados MTA Pro-Root Gray (Dentsply, Tulsa Dental, EE.UU.) y CPM (Cemento Portland Mejorado, Egeo, Argentina) en obturaciones retrógradas. Se utilizaron 32 dientes humanos unirradiculares extraídos y mantenidos en solución salina. El ápice fue resecado previa limpieza y conformación de los conductos. Se realizaron cavidades retrógradas de 3mm de profundidad que fueron obturadas con cada uno de los materiales. Las muestras se dividieron en dos grupos de doce dientes cada una y los ocho dientes restantes fueron considerados grupo control. Mediante curvas de sobrevivientes, a intervalos de 0,2, 4 y 24 horas se evaluó la actividad microbicida o inhibitoria frente a cuatro cepas de microoganismos. Los resultados obtenidos por curvas de desarrollo no mostraron diferencias estadísticamente significativas entre los grupos.

Bacteriological study of paediatric and adult chronic suppurative otitis media.

Chronic suppurative otitis media (CSOM) is one of the commonest illnesses in ENT practice which requires medical attention all the more in children of poor socio-economic status having in past inadequate treatment and negligent medical care. The present study was conducted to find out the various aerobic and anaerobic microorganisms associated with CSOM in paediatric and adult cases and their current antimicrobial susceptibility pattern as a guide to therapy. Samples were collected from 109 clinically diagnosed cases of CSOM and processed according to standard protocols. Out of 74 paediatric CSOM cases, 72 (97.2%) were bacterial culture positive while out of 35 adult CSOM cases, 28 (80%) were culture positive. Bilateral CSOM was slightly more common in adults (25%) than paediatric (21.4%) age group. Polymicrobial nature of CSOM was noted in both paediatric (70.8%) and adult (71.4%) cases while number of organisms isolated per lesion was slightly higher in adults (2.5) as compared to paediatric (1.95) cases. In paediatric CSOM, Staphylococcus aureus was the commonest aerobic isolate while in adult CSOM, Pseudomonas aeruginosa was the commonest one. Among anaerobes Peptostreptococcus spp. was commonest in CSOM where as Prevotella melaninogenica in adult CSOM. Sensitivity of S. aureus to cefuroxime was 72.2% while that of gram negative bacilli was higher to cefotaxime (90 to 100%). Among anaerobes higher sensitivity was seen to metronidazole (98.6%), clindamycin (95.7%) and chloramphenicol (98.6%). In view of the polymicrobial etiology of CSOM, prompt appropriate antimicrobial therapy can effectively reverse the disease process thereby preventing longterm sequelae.

Distribuiçäo de bactérias planctônicas, colônias bacterianas e biofilmes microbianos em dentes decíduos com pulpite e ou necrose pulpar / Distribution of bacterial plankton, bacterial colonies and microbial biofilm on deciduous teeth with pulpitis and pulp necrosis

As bactérias constituem fatores primordiais da contaminaçäo da polpa dentária de dentes decíduos resultando em implicaçöes clínicas e terapêuticas. Com a finalidade de analisar a presença de bactérias planctônicas, colônias e biofilmes microbianos nas estruturas de dentes decíduos portadores de pulpite e necrose pulpar, utilizaram-se 32 dentes decíduos com cárie profunda. Dezesseis dentes foram seccionados no sentido longitudinal e o restante no sentido transversal. Os espécimes foram corados pela hematoxilina-eosina de Harris e Brown e Brenn para análise pela microscopia óptica. A partir da metodologia empregada pôde-se verificar que: 1) Em dentes decíduos com pulpite decorrente de cárie dentária, as bactérias podem ser encontradas nos túbulos dentinários e especialmente no interior do tecido pulpar na área inflamada. Colônias bacterianas e biofilmes microbianos säo visualisados na superfície cariosa e nos focos de liquefaçäo dentinária; 2) As bactérias plactônicas, colônias bacterianas e biofilmes microbianos estäo abundantemente presentes nas câmaras pulpares e canais radiculares de dentes decíduos com necrose pulpar, localizando-se nas superfícies do teto, do soalho da câmara pulpar, nas paredes laterais do canal radicular e, por extensäo, nas paredes externas apicais...

Epidemiology and antimicrobial resistance of B. fragilis group organisms isolated from clinical specimen and human intestinal microbiota

Alguns aspectos epidemiologicos e o perfil de sensibilidade a antimicrobianos de amostras do grupo B. fragilis isoladas de especime clinico e microbiota intestinal humana foram delineados neste estudo. As especies do grupo B. fragilis foram isoladas de 46 (37 por cento) de 124 especimes clinicos, como segue: hemocultura (3), infeccao intra-abdominal (27), abscesso cerebral (2), infeccao de tecido mole (17), seios da face (3), aspirado pleural (9), abscesso pulmonar (3), ferida cirurgica (22), doenca inflamatoria pelvica (22), otite media cronica (9) e diversos (7). Mais da metade destes microorganismos foram isolados de infeccao intra-abdominal e infeccao de tecido mole...

Cultivo e identificaçäo de bactérias anaeróbicas / Till and identification of anaerobic bacterium

Os autores, após sucinto relato histórico sobre microrganismos anaeróbicos tecem consideraçöes sobre cultivo, isolamento e identificaçäo destes seres. Apresentam métodos de cultivo, de isolamento e de identificaçäo. Enumeram características de diversos gêneros de anaeróbios quando submetidos a coloraçäo de gram. Mencionam também as formas e tipos de colônias.

Identificación de bacilos gramnegativos, anaerobios facultativos, oxidasas positivos / Identification of Gram-negative, facultatively anaerobie, oxidase-positive bacilli

Se realizó la identificación de 100 cepas de bacilos gramnegativos, anaerobios facultativos, oxidasas positivos, aisladas de diferentes productos patológicos humanos por métodos bioquímicos convencionales. Del total de las cepas estudiadas 1 correspondió al genero Vibrio, 66 al género Aeromonas y 33 al género Plesiomonas. Se destaca la importancia de establecer estudios de vigilancia de estos microorganismos para investigar su circulación en nuestro medio

Anbiticoterapia en la sepsis a gérmenes anaerobios: revisión bibliográfica / Antibioticotherapy in the sepsis by anaerobic germs: bibliographic review

Se aborda la clasificación y la diversidad de los gérmenesanerobios y su diferente sensibilidad a los antibióticos, comparados en amplia revisión bibliográfica. De particularizan las propiedades del metronidazol, de laclindamicina y de las cefalosporinas. Concluimos cn las ventajas del primero por su efectividad, baja toxicidad y bajo costo . La clindamicina es muy efectiva, pero su exclusividad y alto costo limitan su uso. Las cefalosporinas tienen la virtud de tener un espectro más amplio y de la poca duración de la administración , pero la toxicidad y el alto costo deben tenerse en cuenta. Finalmente van ganando importancia las nuevas penicilinas sintéticas, muy efectivas solas o asociadas, pero de conocimiento aún reciente

Importancia del conocimiento de la flora bacteriana normal en el humano / Significance of the knowledge of the normal bacterial flora in humans

Se efectua una revisión bibliográfica sobre la importancia de la flora bacteriana normal en el humano, haciendo énfasis en la relación y equilibrio de la triada germen-hombre-medio ambiente, su conocimiento y localización en las diferentes áreas corporales, sus interaciones y los variados roles etiopatológicos, producto de la simbiosis con el hombre. El interés de este artículose fundamenta en la necesidad constante, presente y futura que tienen los profesionales del área de la salud de realizar una adecuada interpretación de los hallazgos bacteriológicos en pacientes con enfermedades infecciosas agudas o crónicas, las cuales constituyen una de las principales afecciones que aquejan a nuestra especie